PCR là một kỹ thuật có độ nhạy và độ đặc hiệu cao. Tuy nhiên, chính vì độ nhạy cao cho nên nó cũng rất nhạy với các loại tạp chất. Nhiễm tạp tới các acid nucleci đích có
thể dẫn đến kết quả dương tính giả. Vì vậy, để kiểm soát sự nhiễm tạp này cần có quy trình cụ thể. Sau đây là quy trình xử lý khi gặp nhiễm tạp, chúc các bạn áp dụng thành công.
I/ Thời gian thực hiện việc vệ sinh:
- Hàng tuần hoặc ngay khi có xảy ra nhiễm tạp.
II/ Quy trình xử lý
- Nhiễm tạp thường được tìm thấy trong hóa chất, vật tư tiêu hao (đầu tip, eppendor, các ống) thiết bị và các bề mặt phòng thí nghiệm như bàn, tường, trần…
1/ Nhiễm tạp từ hóa chất, đồ tiêu hao:
- Khi nghi ngờ nhiễm tạp từ hóa chất và đồ tiêu hao, thay thế hóa chất bằng hóa chất trong mẻ khác.
- Không sử dụng lại vật tư tiêu hao như đầu tip, ống eppendorf, găng tay...
2 / Nhiễm tạp từ micro pipet:
- Lau bề mặt của micro pipet bằng khăn giấy ẩm
- Nếu có chất lỏng hút vào bên trong pipet, liên hệ với nhà phân phối sản phẩm để được hướng dẫn xử lý
3/ Nhiễm tạp từ mặt phẳng trong phòng thí nghiệm (mặt sàn, mặt thao tác, tường, trần nhà…):
- Sử dụng chất tẩy rửa (NaOCl- sodium hypochloride).
- Pha loãng chất tẩy rửa tới nồng độ 0.05% (500ppm) với nước sạch. Hiện nay, nồng độ của nước tẩy rửa trên thị trường khoảng 5-6%, để đạt nồng độ 0.05% sử dụng 100 cc nước tẩy rửa pha với 10lit nước.
- Lau bề mặt trong phòng thí nghiệm (sàn thao tác, tường, trần) bằng chất tẩy rửa đã pha loãng.
- Để trong vòng 20 phút sau đó lau lại bằng nước sạch.
- Bật đèn UV trong vòng 30 phút.
- Nước tẩy rửa sau khi pha sử dụng luôn vì NaOCl là chất bị oxy hóa nhanh.
Lưu ý: "Phòng bệnh hơn chữa bệnh", giải pháp trên chỉ là tạm thời trong chốc lát, để có kết quả PCR tốt nhân, không bị nhiễm tạp thì người tiến hành thí nghiệm cần phải tuân thủ đúng những nguyên tắc tránh nhiễm trong Lab ngay từ đầu và trong từng bước tiến hành thí nghiệm. Đó là giải pháp tốt nhất cho cơn ác mộng này. Đôi khi, bạn không có quá nhiều mẫu trong một lô để có thể sửa sai!
Không có nhận xét nào:
Write nhận xét